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苯丙氨酸解氨酶試劑盒操作說(shuō)明書(shū)
更新時(shí)間:2021-05-11 點(diǎn)擊量:1300

貨號(hào):YJS2205                                                 規(guī)格:50管/48樣

苯丙氨酸解氨酶試劑盒說(shuō)明書(shū)

紫外分光光度法

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

PALEC4. 3 1 5)廣泛存在于各種植物和少數(shù)微生物中,是植物體內(nèi)苯丙烷類代謝的關(guān)鍵酶,與一些重要的次生物質(zhì)如木質(zhì)素、異黃酮類植保素、黃酮類色素等合成密切相關(guān),在植物正常生長(zhǎng)發(fā)育和抵御病菌侵害過(guò)程中起重要作用。PAL催化L-苯丙氨酸裂解為反式肉桂酸和氨,反式肉桂酸在290nm處有最大吸收值,通過(guò)測(cè)定吸光值升高速率計(jì)算PAL活性。

試驗(yàn)中所需的儀器和試劑:

紫外分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1ml比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

產(chǎn)品內(nèi)容:

提取液:液體60mL×1,4保存;

試劑一:液體40mL×1瓶,4保存;

試劑二:粉劑×3,4保存,臨用前每瓶加入4mL雙蒸水充分溶解待用;現(xiàn)配現(xiàn)用。

試劑三:液體2.5mL×14保存;

操作步驟:

一、粗酶液提取   

稱取約0.1g組織,加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿。10000g,4離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

二、測(cè)定操作表:

試劑名稱

測(cè)定管(μL

對(duì)照管μL

樣本

20

 

試劑

780

800

試劑

200

200

混勻,30準(zhǔn)確水浴30min

試劑

40

40

 

混勻,靜置10min后,用對(duì)照管調(diào)零,290nm處記錄測(cè)定管吸光值A  (A=A測(cè)定管-A對(duì)照管)。

PAL活性計(jì)算:

1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:

單位的定義:每mg組織蛋白在ml反應(yīng)體系中每分鐘使290nm下吸光值變化0.1定義為一個(gè)酶活力單位。

PALU/mg prot=A×反應(yīng)總體積(1040μL÷樣本體積(20μL÷反應(yīng)時(shí)間(30min)÷0.1 ÷蛋白濃度(mg/mL=17.3×A ÷蛋白濃度(mg/mL

2)按樣本鮮重計(jì)算:

單位的定義:每g組織在ml反應(yīng)體系中每分鐘使290nm下吸光值變化0.1定義為一個(gè)酶活力單位。

PALU/g 鮮重)=A×反應(yīng)總體積(1040μL÷樣本鮮重(g×樣本體積(20μL÷V樣總(1mL)﹞÷反應(yīng)時(shí)間(30min)÷0.1 =17.3×A ÷樣本鮮重(g

 

實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):

ELISA試劑盒免費(fèi)代檢測(cè)

CCK8檢測(cè)

HE染色

蛋白相互作用分析

Western Blot

免疫組化IHC染色

熒光定量PCR

動(dòng)物模型服務(wù)

流式細(xì)胞檢測(cè)

免疫熒光染色

激光共聚焦

DNA甲基化實(shí)驗(yàn)

石蠟/冰凍切片

透射電鏡服務(wù)

掃描電鏡實(shí)驗(yàn)

蛋白雙向(2-D)

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

免疫共沉淀

原位雜交(FIsh

蛋白質(zhì)純化

分子克隆和質(zhì)粒載體構(gòu)建服務(wù)

組蛋白甲基化磷酸化乙酰化

 

蛋白雙向2D-WB

 

藥理毒理動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

 

番紅O固綠染色

明膠酶譜MMP

酶活性檢測(cè)

動(dòng)物造模/模型實(shí)驗(yàn)服務(wù)

 

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